کلون، بیان و تخلیص مایکولیل ترانسفراز c مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در میزبان پروکاریوتی
Authors
abstract
هدف: کمپلکس آنتیژن 85 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس شامل سه پروتئین ترشحی است که خاصیت ایمنیزایی دارند. این پروتئینها کاندیداهای مهمی در طراحی واکسن سل هستند. برای استفاده از این پروتئینها بهعنوان واکسنهای زیرواحدی یا بهعنوان یادآور برای bcg نوترکیب یا واکسنهای dna، تولید آنتیژنهای پروتئینی به شکل نوترکیب الزامی است. پروتئینهای مایکوباکتریوم که در دیواره هستند نسبتاً غیرقطبی است و تولید آنها به شکل نوترکیب در سویه بیانی اشریشیا کلی با پروتئینهای دیگر متفاوت است. هدف از این مطالعه تولید و تخلیص آنتیژن نوترکیب 85c بهعنوان یک ایمنوژن است. مواد و روشها: آنتیژن 85c در حامل پلاسمیدی pjet1.2 و در نهایت در pet32a(+) کلون و در هر دو پلاسمید تعیین توالی شد. القای تولید پروتئین با iptg صورت گرفت و تخلیص با حل کردن اجسام تودهای داخل سلولی در اوره، جذب با رزین نیکل، حذف اوره با شیب کاهشی اوره در محلولهای شستشو و در نهایت جمعآوری پروتئین نوترکیب به شکل محلول انجام شد. تأیید آنتیژنیک پروتئین نوترکیب با وسترن بلات و توسط آنتیبادی ضد پلیهیستیدین، آنتی سرم پلیکلونال خرگوشی ضد مایکوباکتریوم توبرکولوزیس و سرم بیمار سلی بستری انجام شد. نتایج: ژن آنتیژن 85c با موفقیت کلون و با تعیین توالی تأیید شد. آنتیژن 85c در میزبان اشریشیا کلی بیان و تخلیص شد. نتیجهگیری: نتایج وسترن بلات به موازات نتایج تعیین توالی نشان دهنده درستی تولید پروتئین آنتیژن 85c نوترکیب و حفظ نسبی ساختار اپیتوپی آن است.
similar resources
کلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین پیلین سودوموناس آئروژینوزا در میزبان پروکاریوتی
زمینه و اهداف: سویه های پاتوژن سودوموناس آئروژینوزا پیلی قطبی تولید می کند که برای تحرک، چسبندگی و تهاجم مورد نیاز است. هدف از این مطالعه تولید و تخلیص پروتئین نوترکیب پیلین می باشد. مواد و روش ها: ژن کد کننده پیلین (pilA) از سویه PAO1 سودوموناس آئروژینوزا با بوسیله PCR جدا گردید و در وکتور بیانی pET-22b کلون شد. تایید ساختار وکتور نوترکیب به وسیله ی هضم آنزیمی دوگانه و تعیین توالی صورت گرفت....
full textکلون کردن ژنm2e ویروس آنفولانزا تیپ آبه همراه ژن 70-hsp مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در وکتور پروکاریوتی
71 بحث 7 2 تکثیر گردید.پس از تأیید قطعات محصول hsp و 70 m2e ژن ،pcr باطراحی پرایمرجهت بر روی ژل، در مرحله بعد جهت تخلیص باند مورد نظر و حذف دیگر ترکیبات و pcr را در این مرحله به مقدار زیاد انجام دادیم،رعایت این pcr ,pcr ناخالصی های موجود در واکنش ، pcr در 50 درصد از نمونه انجام می گیرد 0 تخلیص محصول pcr نکته الزامی بود که واکنش بهینه می باشد. به همین دلیل با تخلیص دقیق باند مورد نظر liga...
15 صفحه اولکلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین پیلین سودوموناس آئروژینوزا در میزبان پروکاریوتی
زمینه و اهداف: سویه های پاتوژن سودوموناس آئروژینوزا پیلی قطبی تولید می کند که برای تحرک، چسبندگی و تهاجم مورد نیاز است. هدف از این مطالعه تولید و تخلیص پروتئین نوترکیب پیلین می باشد. مواد و روش ها: ژن کد کننده پیلین (pila) از سویه pao1 سودوموناس آئروژینوزا با بوسیله pcr جدا گردید و در وکتور بیانی pet-22b کلون شد. تایید ساختار وکتور نوترکیب به وسیله ی هضم آنزیمی دوگانه و تعیین توالی صورت گرفت. و...
full textکلون، بیان و تخلیص پروتئین P647-153هموفیلوس آنفلوانزا
زمینه و هدف: همـوفیلوس آنفلوانزا، باسیل گرم منفی است که بخشی از میکروفلور نازوفارنکس را در اغلب افراد تشکیل داده و سویه های مختلف آن در دو گروه کپسولدار (قابل طبقه بندی) و بدون کپسول (غیرقابل طبقه بندی) مورد مطالعه قرار میگیرد. پروتئین غشاء خارجی P6 ، نوعی ایمونوژن حفاظت شده و پایدار درمیان سویههای فاقد کپسول و نیز سویههای کپسولدار هموفیلوس آنفلوانزا میباشد و خود بعنوان کاندید مناسبی جهت ...
full textرنگ آمیزی معکوس: روشی مؤثر برای تخلیص پروتئین HIV-1 Nef در سیستم بیان پروکاریوتی
سابقه و هدف: پروتئین Nef، یکی از پروتئین های تنظیمی ویروس HIV، دارای اپیتوپ های حفاظت شده متعددی است که در افراد آلوده به ایدز پاسخ های ایمنی قدرتمندی علیه آن ها مشاهده شده است. بنابراین، پروتئین Nef کاندید مناسبی برای تولید واکسن می باشد. هدف این پژوهش کلونینگ و بیان پروتئین Nef در سیستم بیان پروکاریوتی و تخلیص آن به روش رنگآمیزی معکوس می باشد. مواد و روش ها: توالی کدکننده پروتئین Nef ...
full textکلون، بیان و تخلیص پروتئین p۶۴۷-۱۵۳هموفیلوس آنفلوانزا
زمینه و هدف: همـوفیلوس آنفلوانزا، باسیل گرم منفی است که بخشی از میکروفلور نازوفارنکس را در اغلب افراد تشکیل داده و سویه های مختلف آن در دو گروه کپسولدار (قابل طبقه بندی) و بدون کپسول (غیرقابل طبقه بندی) مورد مطالعه قرار میگیرد. پروتئین غشاء خارجی p6 ، نوعی ایمونوژن حفاظت شده و پایدار درمیان سویههای فاقد کپسول و نیز سویههای کپسولدار هموفیلوس آنفلوانزا میباشد و خود بعنوان کاندید مناسبی جهت وا...
full textMy Resources
Save resource for easier access later
Journal title:
پژوهش های آسیب شناسی زیستیجلد ۱۴، شماره ۴، صفحات ۱-۱۲
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023